RNase InhibitorRNA酶抑制劑 提取配套產(chǎn)品
本制品是經(jīng)過(guò)大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白，與RNase A形成1：1復(fù)合體，對(duì)RNase 表現(xiàn)高度的非競(jìng)爭(zhēng)性抑制（Ki=3×10-10 M）。該反應(yīng)是可逆的，通過(guò)尿素及疏基類試劑能夠解離復(fù)合體，使RNase 復(fù)活而抑制劑不可逆失活。RNase InhibitorRNA酶抑制劑 提取配套產(chǎn)品
RNA 酶抑制劑
RNase Inhibitor
RNase InhibitorRNA酶抑制劑 提取配套產(chǎn)品
目錄號(hào)：91315
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 保存 | 91315-2000 |
RNase Inhibitor | -20℃ | 50μl(40U/μl) |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本制品是經(jīng)過(guò)大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白，與RNase A形成1：1復(fù)合體，對(duì)RNase 表現(xiàn)高度的非競(jìng)爭(zhēng)性抑制（Ki=3×10-10 M）。該反應(yīng)是可逆的，通過(guò)尿素及疏基類試劑能夠解離復(fù)合體，使RNase復(fù)活而抑制劑不可逆失活。
本品屬蛋白質(zhì)性質(zhì)，與其它競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑（核酸類、無(wú)機(jī)磷酸類）不同，可以很容易地通過(guò)苯fen處理將其從反應(yīng)體系中除去。
活性定義：
抑制5ng RNase A活性的50%所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）。
注意事項(xiàng)：
－20℃保存，避免起泡，避免劇烈振蕩或攪拌。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)
使用方法：
第一鏈cDNA合成(以20μl反應(yīng)體系為例)
1、加入
Components | Volume |
Total RNA/mRNA | 50 ng-5 μg / 5-500 ng |
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or Random Primer(0.1 μg/μl) or GSP(Gene Specific Primer) dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
1 μl | |
2 pmol 1 μl | |
5× RT Buffer | 4 μl |
RNase Inhibitor(40 units/μl) | 0.5~1 μl |
TUREscript Hˉ RTase | 1 μl |
RNase free H2O to final volume | 20 μl |
2、輕輕混勻
如用Oligo(dT)18或基因特異引物(GSP)，42℃孵育50min。
如用Random Primer，25℃孵育10min，42℃孵育50min。
3、85℃加熱5min失活RTase。
4、PCR/qPCR:cDNA可直接用于PCR反應(yīng)或儲(chǔ)存于-20°C。
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